Cultures de cellules souches neurales de rongeurs (neurones, astrocytes, oligodendrocytes, microglies, macrophages, cellules souches mésenchymateuses) exposées à différentes agressions (IL-1beta, IL-6, TNF-alpha, LPS, Poly:IC, bêta-amyloïde, différents analogues du glutamate).
Co-cultures de deux types de cellules primaires de rongeurs, avec ou sans contacts mécaniques, exposées à différentes agressions.
Cultures primaires de cellules souches neurales humaines, de microglies, d'astrocytes et de cellules souches mésenchymateuses humaines exposées à différentes agressions.
Cellules souches pluripotentes induites (IPS) humaines provenant d’individus contrôles et de patients atteints de troubles génétiques du développement neurologique : cultures 2D et 3D - organoïdes cérébraux.
Read-out
phénotypage cellulaire, survie, prolifération et différenciation ; production de cytokines-chemokines, espèces réactives de l’oxygène, vésicules extracellulaires, facteurs trophiques; métabolisme énergétique (Hippocampe).
Rongeurs
Lignées de souris transgéniques (Cre-LoxP) spécifiques de la microglie
Encéphalopathie de la prématurité : administration systémique d'IL-1beta ou de LPS, administration intracérébrale d'analogues du glutamate.
Lésion cérébrale traumatique : impact rapproché de la tête au cours du développement cérébral.
Modèles « double-hit » : inflammation combinée à un traumatisme retardé, à de l’excitotoxicité ou de l’inflammation.
Nanoparticules d’ADN ciblant spécifiquement la microglie (souris et rat)
Read-out
évaluation neuropathologique ; immunofluorescence et quantification ; RNAscope ; phénotypage des cellules cérébrales et immunitaires (FACS) ; RNA-seq en vrac sur des populations de cellules triées (MACS) ; scRNA-seq : transcriptomique spatiale (technologie Visium) ; intégrité de la barrière hémato-encéphalique ; tests comportementaux (performances motrices et cognitives, interactions sociales, anxiété, agressivité) au cours du développement et à l'âge adulte ; connectivité fonctionnelle du cerveau (échographie fonctionnelle).
Homme
Centre d’Investigation Clinique pédiatrique, centre de ressources biologiques (y compris les tissus cérébraux post-mortem), cohortes stratifiées de patients
Read-out
Imagerie par résonance magnétique (IRM), électroencéphalogramme (EEG) haute densité, phénotypage neurologique, neuropsychologique et comportemental, phénotypage immunitaire (FACS), génotypage.
Panorama exhaustif de notre offre concernant les maladies NEURODEVELOPPEMENTALES :
Modèles rongeurs d’étude de l’encéphalopathie du prématuré pour la recherche de cibles thérapeutiques et pour le criblage d’agents thérapeutiques
Modèles rongeurs d’encéphalopathie du prématuré
Modèles adaptés à la recherche de thérapeutiques ayant pour cible la neuroinflammation (induite par une inflammation systémique produite par IL-1beta, IL-6, TNF-alpha, LPS, ou Poly :IC).
Modèles adaptés aux études fonctionnelles et aux conséquences à long terme (double hit et facteur prédisposant à la survenue de pathologies cérébrales à l’âge adulte).
Outils d’analyse : identification des mécanismes cellulaires et moléculaires et mesures d’efficacité thérapeutique
Suivi temporel du phénotypage cellulaire : IF avec quantification, RNAscope, FACS pour cellules immunes et cérébrales, y compris la phagocytose de marqueurs synaptiques (https://www.neuroinflammation.fr/index.html#microglie).
Suivi temporel de la barrière hémato-encéphalique (IF, qRT-PCR, dextrans, octréotide).
Identification des mécanismes moléculaires : qRT-PCR et RNA-seq sur populations cellulaires triées par MACS, scRNA-seq, spatial transcriptomics par technologie Visium.
Analyse du comportement moteur et cognitif, des interactions sociales (Live Mouse Tracker) et agressivité, et du métabolisme énergétique durant le développement (https://neophen.org) et à l’âge adulte.
Analyse de la connectivité fonctionnelle cérébrale par imagerie cérébrale par ultrasons fonctionnels (fUS) (système Iconeus One ; collaboration avec Mickael Tanter, ESPCI, Institut Langevin, Paris, France).
Modèles rongeurs de traumatisme crânien pédiatrique pour la recherche de cibles thérapeutiques et pour le criblage d’agents thérapeutiques
Modèle rongeur de traumatisme crânien pédiatrique
Modèles adaptés à la recherche de thérapeutiques ayant pour cible la neuroinflammation induite par un traumatisme crânienne (lâcher de poids sur crâne fermé) durant la période neurodéveloppementale inflammation systémique produite par IL-1beta, IL-6, TNF-alpha, LPS, ou Poly :IC).
Modèles adaptés aux études fonctionnelles et aux conséquences à distance (autres structures cérébrales) et à long terme (phase tertiaire).
Outils d’analyse : identification des mécanismes cellulaires et moléculaires et mesures d’efficacité thérapeutique
Suivi temporel du phénotypage cellulaire : IF avec quantification, RNAscope, FACS pour cellules immunes et cérébrales, y compris la phagocytose de marqueurs synaptiques (https://www.neuroinflammation.fr/index.html#microglie).
Suivi temporel de la barrière hémato-encéphalique (IF, qRT-PCR, dextrans, octréotide).
Identification des mécanismes moléculaires : qRT-PCR et RNA-seq sur populations cellulaires triées par MACS, scRNA-seq, spatial transcriptomics par technologie Visium.
Analyse du comportement moteur et cognitif, des interactions sociales (Live Mouse Tracker) et agressivité, et du métabolisme énergétique durant le développement (https://neophen.org) et à l’âge adulte.
Analyse de la connectivité fonctionnelle cérébrale par imagerie cérébrale par ultrasons fonctionnels (fUS) (système Iconeus One ; collaboration avec Mickael Tanter, ESPCI, Institut Langevin, Paris, France).
Essais cliniques de Phases 2 et 3 sur des cohortes de patients avec maladies neurodéveloppementales
CIC pédiatrique de l’Hôpital Robert Debré Centre de Ressources Biologiques, y compris tissus cérébraux Différentes cohortes néonatales et pédiatriques phénotypées cliniquement, et génotypées pour certaines d’entre elles
Outils
IRM 3T avec possibilité d’imagerie IRM en tenseur de diffusion (DTI), morphométrie et imagerie de perfusion
Electroencéphalogramme (EEG) haute définition
Phénotypage immunitaire sanguin (FACS, Luminex, production de ROS)